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- 中山杉离体快繁技术初探
- 发布日期:[2020/08/20]
中山杉作为一种林业绿化新种,关于其引种栽培和生物学特性的研究报道较多,但没有与其组培快繁相关的资料,因此试验初期选用MS、B5、White、WS、SH等不同基本培养做了预培养试验,根据预培养效果选择了MS、B5、SH3种培养基来进行系统对比试验。此外在激素选择方面,为了诱导芽的萌发和分化,先后采用BA、KT、ZT等不同细胞分裂素进行预试验, 把目标放在了BA使用水平的探索上,但对生长素的使用没有进行详细探讨,这可能也是试验中芽诱导率不高的原因之一。
中山杉外植体的取材和消毒是试验的难点,其枝条及叶柄皱褶很多,不易消毒彻底,即使接种数周后仍会有污染产生,而且几乎全部表现为真菌污染,所以在取材时应尽量选择当年新生的嫩枝和新芽,并在消毒前剪去枝条和叶柄,只留下顶芽、侧芽和嫩绿的茎段。在消毒试验中,利用组培实验室常规的0.1%HgCl2和2%NaClO消毒效果都不理想,直至把NaClO浓度调高到10%、处理时间延长到30min才勉强解决了外植体消毒的问题,但是使用高浓度消毒液长时间消毒对外植体的损伤问题也随之显现,外植体在消毒后切口位置明显受损,接种培养后会很快褐化或呈白色水渍状并逐步死亡,因此消毒后的外植体在接入培养基前应仔细切掉受损部位,并在培养基中加入抑制褐变危害的添加物。
综上所述,该试验在外植体消毒、初代芽诱导培养基筛选、生根培养条件选择中分别得到如下结论:外植体消毒以10%次氯酸钠溶液浸泡30min效果为 ,消毒后外植体污染率为26.7%,芽存活率为60%;适宜于中山杉芽诱导与增殖的培养基为附加10mg/L6-BA、2g/LAC、30g/L蔗糖、8g/L琼脂的SH培养基,外植体在该培养基上培养42d,芽诱导率接近50%,增殖系数 可达3.6;在生根培养试验中,以附加2.0mg/LNAA、15g/L蔗糖、8g/L琼脂的1/2MS培养基效果最为理想,中山杉无根小苗在该培养基上培养28d,生根率可达85.8%,生根指数为4.9。
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