植物材料:种子来自恩施州利川市忠路镇合心村原生水杉母树4541号(海拔1153m，地理位置为108°38'53″E，30°07'20″N，85年生，树高30m，胸径105．6cm)。于2017年10月份进行采种，千粒重2．47g。采种后种子用密封袋封存放入4℃冰箱冷藏备用(景丹龙等，2011)。

方法采用影响种子萌发的三个主要条件:温度、光照、是否浸种作为初始条件，找出水杉种子萌发的 条件。

浸种首先人工筛选大小一致，相对饱满的2400粒水杉种子，用75%酒精溶液消毒处理1min后，再用蒸馏水冲洗五遍，用滤纸吸去多余的水分。其中1200粒放在45℃蒸馏水中浸种48h(李会芳等，2006)，使种子充分吸水，然后将种子滤出，剩下1200粒不浸种。1．2．2光照光照条件为模拟自然12h光照/12h黑暗恒温催芽和24h全黑暗处理催芽。全黑暗处理条件下将装有水杉种子的培养皿包上锡箔纸并套上多层黑色塑料袋同样放置在12h光照/12h黑暗恒温培养箱内，在绿光等下进行种子观测。

温度将以上经过浸种和光照处理的种子分别放在温度为20、25、30℃(此三个温度梯度的设置是在已有实验结果的基础上进行，研究成果未发表)的恒温箱里进行恒温催芽。总共12个处理，每处理50粒种子，重复4次。为了维持培养皿内的水分，之后每隔24h观察一次，进行萌发检测、统计萌发个数，并适量添加蒸馏水，保持滤纸湿润。

不同浓度外源亚硒酸钠人工筛选大小一致，相对饱满的1600粒水杉种子。配置浓度分别为0(CK)、0．25、0．5、1．0、2．0、4．0、8．0、16．0mg·L-1的亚硒酸钠溶液，将水杉种子放在不同浓度的亚硒酸钠溶液中浸种12h，使种子充分吸水，然后将种子滤出。按试验设计每个处理选取50粒种子，4个重复。将种子放入事先已放好滤纸的9cm培养皿，加入适当的蒸馏水保持滤纸湿润，之后每隔24h观察一次，进行萌发检测、统计萌发个数，并适量添加蒸馏水，保持滤纸湿润。

测定指标与计算从种子放进培养箱开始，每隔24h对各培养皿内种子发芽的情况进行观察记录，以肉眼看到白色的幼根为标准，判断种子是否萌发。每一组保证观察时差在10min之内，共观察4个星期。通过记录的数据，对每种处理种子的发芽率、发芽势和发芽指数。发芽率G=发芽种子数Ga/供试种子数Gn×100%;发芽势=第7天发芽种子数G7/供试种子数Gn×100%;发芽指数GI=∑Gt/Dt，式中Gt为与Dt相对应的每天发芽种子数，Dt为发芽天数。数据处理采用Excel软件记录转换数据，SPSS18．0软件进行数据统计分析，GraphPadPrism5绘制统计图。对不同浓度亚硒酸钠对水杉种子萌发指标的影响结果进行方差分析和多重比较(Ducan)，显著性水平均设定为ɑ=0．05。